流式細胞術工作原理與實驗步驟
點擊次數：662 更新時間：2024-10-29
流式細胞術原理
流式細胞術是一種細胞分析技術。
流式細胞術工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞，并能同時從一個細胞中測得多個參數，具有速度快、精度高、準確性好的優點，是當代最xian進的細胞定量分析技術之一。
流式細胞術是一種用于細胞計數、細胞分類、生物標志物檢測和蛋白質工程的技術。將熒光標記或有自身固有熒光細胞懸液，通過噴嘴噴射出，以單細胞流動的液流，用波長可調的激光照射并逐一探測、記錄和分析每一個細胞的熒光，能以每秒幾千個細胞的速率，實時對這些細胞的物理或化學特征，進行多參數分析。
流式細胞術實驗步驟：
1、制備細胞懸液，計數
2、分裝，按照每個EP（1.5ml）管1-2*10 6個細胞分裝，3500rpm，4度離心。
3、用100ulPBS重懸，加入10ul大鼠血清封閉，4度避光30min。
4、加入相應的熒光標記的抗體，混勻，避光，4度孵育30min。
5、加入1mlPBS洗兩遍。
6、用200ul PBS重懸，經紗布過濾轉至流式管，上級檢測。
細胞或者大小接近的顆粒物質都可以檢測。
樣本通過鞘液的輸送，成單個隊列依次通過激光束。樣本事先可以根據檢測需要被熒光標記，通過激光束的時候就會得到熒光信號，被記錄下來。可以同時標記不同的熒光標記做不同的檢查。優點就是可以在短時間內檢測大量的樣本（每秒幾千個到幾萬個細胞）。
主要應用于各種生物醫學研究和臨床診斷。國際上通用的白細胞和淋巴瘤的診斷標準就是靠流式細胞儀的分型來確定的。
