上海遠慕生物科技詳細為您講述小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作要求，注意事項，適用范圍，用途，使用說明書等資訊，本司專業供應進口/國產ELISA試劑盒，質粒載體，動物血清血漿，標準品對照品，培養基，抗體，化學試劑，生化試劑，實驗耗材，染色液，其他試劑等，提供ELISA試劑盒免費代測服務，全程提供操作指導，ELISA種屬：大鼠，人，小鼠，植物，馬，牛，兔，雞，豬，犬，豚鼠，駱駝及其他動物，本司質粒載體*進行中，咨詢！
中文名：小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒
別名：小鼠白介素6(IL-6)ELISA Kit
供應商：上海遠慕
規格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6個月
產品特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關蛋白無交叉反應。
產品實驗設備：酶標儀， 37℃恒溫箱，自動洗板機，可調節移液器以及其吸頭，蒸餾水，干凈的試管，容量瓶等。
產品應用領域：本ELISA試劑盒限科研，嚴禁臨床使用。
特點：靈敏性高、特異性強、重復性好。
檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
預期應用：ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。
用途：用于測定人血清,血漿,組織及相關液體樣本中的含量或活性。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒組成：
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ；
2 酶標試劑 6ml×1 瓶；
3 酶標包被板 12 孔×8 條 ；
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶；
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ；
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶；
7 終止液 6ml×1 瓶；
8 標準品（48ng/ml） 0.5ml×1 瓶；
9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶；
10 說明書 1 份；
11 封板膜 2 張；
12 密封袋 1 個；
小鼠白介素6(IL-6)ELISA檢測試劑盒安全性：
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作要求準備：
試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。
1. 標準品復溶：試劑盒提供6管標準品，每管已標定濃度，并且凍干。實驗前在每個標準品管中加入0.5mL樣本稀釋液，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動助其溶解，使其恢復為每個標準品管身標注的濃度。
2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作步驟：
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀 釋。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl， 然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色 15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作要求注意事項：
1.在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。
2.建議新鮮標本收集后盡早檢測。1-3天左右檢測的樣本可儲存在4℃備用。如有特殊原因需要周期性收集標本，請將標本及時分裝后放在-20℃或- 70℃條件下保存，避免反復凍融。
3.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。
4.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。
5.一次加樣時間控制在5分鐘內.
6.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。
7.如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數。
8.在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。
9.底物請避光保存。
10.不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒液體類標本：
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1）血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/ 分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并 放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5）組織標本：
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA檢測試劑盒技術原理：
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
