上海遠(yuǎn)慕生物科技詳細(xì)為您講述小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作要求，注意事項(xiàng)，適用范圍，用途，使用說(shuō)明書(shū)等資訊，本司專(zhuān)業(yè)供應(yīng)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒，質(zhì)粒載體，動(dòng)物血清血漿，標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品，培養(yǎng)基，抗體，化學(xué)試劑，生化試劑，實(shí)驗(yàn)耗材，染色液，其他試劑等，提供ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，全程提供操作指導(dǎo)，ELISA種屬：大鼠，人，小鼠，植物，馬，牛，兔，雞，豬，犬，豚鼠，駱駝及其他動(dòng)物，本司質(zhì)粒載體*進(jìn)行中，咨詢(xún)！
中文名：小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒
別名：小鼠白介素6(IL-6)ELISA Kit
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6個(gè)月
產(chǎn)品特異性：本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)設(shè)備：酶標(biāo)儀， 37℃恒溫箱，自動(dòng)洗板機(jī)，可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭，蒸餾水，干凈的試管，容量瓶等。
產(chǎn)品應(yīng)用領(lǐng)域：本ELISA試劑盒限科研，嚴(yán)禁臨床使用。
特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好。
檢測(cè)原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
用途：用于測(cè)定人血清,血漿,組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒組成：
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ；
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶；
3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 ；
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶；
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ；
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶；
7 終止液 6ml×1 瓶；
8 標(biāo)準(zhǔn)品（48ng/ml） 0.5ml×1 瓶；
9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶；
10 說(shuō)明書(shū) 1 份；
11 封板膜 2 張；
12 密封袋 1 個(gè)；
小鼠白介素6(IL-6)ELISA檢測(cè)試劑盒安全性：
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作要求準(zhǔn)備：
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶：試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品，每管已標(biāo)定濃度，并且凍干。實(shí)驗(yàn)前在每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5mL樣本稀釋液，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)助其溶解，使其恢復(fù)為每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度。
2. 20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1：20稀釋?zhuān)?份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作步驟：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀 釋。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl， 然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復(fù) 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色 15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作要求注意事項(xiàng)：
1.在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。
2.建議新鮮標(biāo)本收集后盡早檢測(cè)。1-3天左右檢測(cè)的樣本可儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩Ｈ缬刑厥庠蛐枰芷谛允占瘶?biāo)本，請(qǐng)將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或- 70℃條件下保存，避免反復(fù)凍融。
3.當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。
4.洗滌過(guò)程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。
5.一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi).
6.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。
7.如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。
8.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。
9.底物請(qǐng)避光保存。
10.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒液體類(lèi)標(biāo)本：
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1）血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/ 分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5）組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)原理：
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
(2). 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
(3). 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。
(4). 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5). 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。
